产品货号:
YT465
中文名称:
C端DsRed标签融合蛋白质粒
英文名称:
C-DsRed plasmid(with CMV promoter)
产品规格:
1μg|100μg
发货周期:
1~3天
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pCMV-C-DsRed是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含DsRed (Discosoma sp.red fluorescent protein,香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个DsRed的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用DsRed抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
Multiple cloning site | 651-740 |
DsRed | 741-1419 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1478-1499 |
SV40 polyA signal | 1511-1894 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2032-2338 |
bla promoter | 2363-2487 |
SV40 promoter | 2507-2845 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2869-3661 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3662-4130 |
pUC origin | 4259-4926 |
组分 | 1μg | 100μg |
>pCMV-C-DsRed质粒 | 1μg | 100μg |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
- pCMV-C-DsRed质粒中没有的酶切位点包括:
AclI AflII AgeI AscI AsiSI BaeI BbvCI BcgI BlpI BmgBI Bpu10I BsiWI BsmBI BspEI BspQI BssHII BstZ17I EarI EcoNI FseI NruI PmeI PmlI PpuMI PshAI PspXI SapI ScaI SgrAI SpeI SwaI XcmI XmnI - pCMV-C-DsRed质粒质粒中的单酶切位点包括:
NdeI CA`TA,TG 240 BbsI GAAGACNN`NNNN, 1161 SnaBI TAC|GTA 346 BsrGI T`GTAC,A 1279 CspCI ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` 380 PflMI CCAN,NNN`NTGG 1319 NheI G`CTAG,C 597 PspOMI G`GGCC,C 1420 BmtI G,CTAG`C 597 ApaI G,GGCC`C 1420 SacI G,AGCT`C 651 PvuI GCAGTG,NN` 1500 Eco53kI GAG|CTC 653 BclI T`GATC,A 1656 BstXI CCAN,NNNN`NTGG 659 MfeI C`AATT,G 1749 SacII CC,GC`GG 660 HpaI GTT|AAC 1762 NotI GC`GGCC,GC 668 BtsI GCAGTG,NN` 1836 TspMI C`CCGG,G 680 MluI A`CGCG,T 1885 XmaI C`CCGG,G 680 SfiI GGCCN,NNN`NGGCC 2771 SmaI CCC|GGG 682 ClaI AT`CG,AT 2839 SrfI GCCC|GGGC 682 BspDI AT`CG,AT 2839 BamHI G`GATC,C 687 KasI G`GCGC,C 2998 HindIII A`AGCT,T 693 NarI GG`CG,CC 2999 EcoRI G`AATT,C 705 PluTI G,GCGC`C 2998 EcoRV GAT|ATC 713 SfoI GGC|GCC 3000 SalI G`TCGA,C 717 MscI TGG|CCA 3081 AccI GT`MK,AC 718 Tth111I GACN`N,NGTC 3117 XhoI C`TCGA,G 729 PflFI GACN`N,NGTC 3117 PaeR7I C`TCGA,G 729 BsrDI GCAATG,NN` 3230 XbaI T`CTAG,A 735 RsrII CG`GWC,CG 3515 BstEII G`GTNAC,C 881 BstBI TT`CG,AA 3681 AhdI GACNN,N`NNGTC 919 BsaI GGTCTCN`NNNN, 3988 AfeI AGC|GCT 1023 ApaLI G`TGCA,C 4603 SbfI CC,TGCA`GG 1077 PciI A`CATG,T 4917
pCMV-C-DsRed质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T3 primer (620-639):5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-DsRed primer (852-873):5′- TGGCGGTCTGGGTGCCCTCGTA -3′
pCMV-C-DsRed质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1.pCMV-C-DsRed质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
- 本质粒未经百奥莱博书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pCMV-C-DsRed质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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